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Product Center
產(chǎn)品簡介
PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：NFKB p52/NF-κB2 p0/FITC 熒光標記核因子/k因結(jié)合核因子 p52/p0抗體IgG阿魏 99%Phospho-NF-κB2 p0 (Ser866/870)/FITC 熒光標記核因子/k因結(jié)合核因子p0抗體IgG阿魏 ，≥99.5%（HPLC）p-NFKBp65(Ser536)/FITC 熒光標記化核因子/化k因結(jié)
產(chǎn)品分類
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樣本實驗前準備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒 |
英文名稱 | PCDH1 ELISA Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028655 |
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
操作步驟：
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
標本要求：
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
需要而未提供的試劑和器材：
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規(guī)格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6. 蒸餾水，容量瓶等。
備試劑與收集血樣：
1. 收集標本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。
2. 標準品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標準 管 8 管，管加標本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七 管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。
4. 洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 巴美靈二乙二丁醋酯 98%燒石棉 CP，20-30目
心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 白曼陀羅素N,N-二乙酰 P,98.0% 氫鈉 AR（劇品）
肌球蛋白重鏈(MHC)試劑盒 白桑八N,N-二乙 99.0%亞硝鈷鈉 99.995% metals basis
肌球蛋白重鏈(MHC)試劑盒 半齒澤蘭素色烯N,N-二乙 CP,98.0% 燒石棉 CP, 10-20目
熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒半翅鹽膚木內(nèi)酯N,N-二乙 重蒸餾, ≥99.5%鄰聯(lián)苯 AR，98%
熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒北升麻寧雙烯酰 99%鄰聯(lián)苯 CP，97%
血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)試劑盒 苯酰硫二乙酯 CP鄰聯(lián)苯 分析標準品,用于環(huán)境分析，≥99%（GC)
血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)試劑盒 吡喃葡糖硫二乙酯 GR鹽鄰聯(lián)苯 AR
心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)試劑盒 鞭打繡球甙 A3-二 99%式碳鋅 AR,57.5%
心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)試劑盒 鞭打繡球 B二異丁 異構(gòu)體混合物，97%甘氨 AR,99.5-100.5%
血管舒緩激肽(BK)試劑盒 表斷馬錢子甙半縮內(nèi)酯二異丁 99%甘氨鈉 98%
血管舒緩激肽(BK)試劑盒 表千金藤默星異辛 AR甘氨酯鹽鹽 99%
肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒波爾定異辛 CP,98.0%甘氨乙酯鹽鹽 99%
肌球蛋白輕鏈(MLC)試劑盒補骨脂A乙酰乙乙酯 AR,98%氟鋁 98.5%
α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒布拉易林乙酰乙乙酯 CP,97%氟硅 AR,99.0%
α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)試劑盒布盧門 B乙酰乙乙酯 >99.0%(GC)氟硅 99.999% metals basis
PCDH1原鈣黏素1ELISA試劑盒溴化乙啶（Ethidium Bromide EB）是一種DNA 結(jié)合性熒光色素，其激發(fā)波長510nm。發(fā)射波長595nm。產(chǎn)生桔紅色熒光。
EB 不具有膜通透性，不能透過活細胞膜，只能染死細胞，因此用EB 單染時，正常細胞不著色，早期凋亡細胞呈微弱桔紅光，晚期凋亡細胞桔紅色熒光增強。死細胞呈強桔紅光。EB 常與橙合用雙染進行凋亡檢測，與橙雙染時，正常細胞中EB 不能透膜著色，而橙可透過細胞膜，使細胞呈綠色均勻熒光，細胞圓形均勻；而在凋亡細胞中，細胞皺縮、染色質(zhì)凝聚、固縮或斷裂，出芽，凋亡小體形成。染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色顆粒；而壞死細胞被EB 染成桔紅色，由此熒光顏色和細胞形態(tài)可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。
儲存：2-8℃，避光，有效期12個月。
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