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產品簡介
草魚出血熱病毒（GCHV）核酸試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:標記碳酸酐酶2IgG100 ul蛋白激酶A錨定蛋白6Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位IgG100 ul肺α/β水解酶蛋白1caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標記鈣調結合蛋白/鈣調素結合蛋白IgG100 u
產品分類
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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格 |
規格 | 48T |
貨號 | LZP8057 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
京尼平苷酸Cre Recombinase (D7L7L) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-羥基-5-甲基吡啶
京尼平苷酸(標準品)Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb2-溴-5-氟
原兒茶酸,3,二羥基甲酸Phospho-Jak3 (Tyr980/981) (D44E3) Rabbit mAb硝酸鍶
原兒茶酸(標準品)DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb無水化鈣
原兒茶,3,二羥基甲DNMT1 (D63A6) XP® Rabbit mAb1,4,7,10-四氮環十二烷四鹽酸鹽
原兒茶(標準品)ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb硫酸亞鐵銨
甲砜霉素甘氨酸酯鹽酸鹽ERp72 (D70D12) XP® Rabbit mAb2,6-二甲基大茴香
2.二羥基-6-甲基-煙酸酯La Antigen (D19B3) Rabbit mAb過氧化單硫酸鹽
恩拉霉素,持久殺菌素HSP27 (E1J4D) Rabbit mAb (IHC Preferred)溴化基鎂
(+)-兒茶素水合物SimpleChIP® Human γ-Actin Promor Primers硝酸鑭
(+)-兒茶素水合物（標準品）SGLT1 Antibody基化鎂
(+)-兒茶素（標準品）mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)9-蒽酸
維生素B6,鹽酸吡哆Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244) (D68F8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴-氟甲酸
維生素B6（標準品）α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)脫羧雷他定
非達霉素SimpleChIP® Human γ-Actin Intron 3 Primers嘧啶-5-甲
比枯枯靈,右旋荷包牡丹mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-基吡啶
比枯枯靈,右旋荷包牡丹（標準品）STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred)溴-氟甲酸
石杉甲Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)四氫吡喃-2-甲
細胞分裂周期蛋白5phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 熒光素標記兔抗、非受體酪氨酸激酶c-AblIgG100 ul
β淀粉樣肽/Aβ42Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 熒光素標記兔抗、大、組蛋白去酰化酶3IgG100 ul
ADCK4蛋白CAD/CPAN/FITC 熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶IgG100 ul
抑癌蛋白AIMP3CA I/FITC 熒光素標記碳酸酐酶1IgG100 ul
相關蛋白AKAPCA II /FITC 熒光素標記碳酸酐酶2IgG100 ul
蛋白激酶A錨定蛋白6Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標記蛋白酸酯酶-2B催化亞單位IgG100 ul
肺α/β水解酶蛋白1caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標記鈣調結合蛋白/鈣調素結合蛋白IgG100 ul
水解酶結構域蛋白13p-Caldesmon/FITC 熒光素標記酸化鈣介質素IgG100 ul
水解酶結構域蛋白14BSmoothened/SMOH /FITC 熒光素標記跨膜蛋白SmoothenedIgG100 ul
草魚出血熱病毒(GCHV)核酸試劑盒價格δ氨基乙酰丙酸脫酶抗體Dihydrooxoepistephamiersine中文名：別名：分子式：C21H277
肌側索硬化癥相關蛋白4抗體Mangochinine中文名：別名：(1R,2S)-(-)-Mangochinine分子式：C19H224
錨蛋白重復結構域蛋白12抗體Acetylcephalotaxine中文名：別名：分子式：C20H235
錨蛋白重復結構域蛋白13A抗體2,7-Dihydrohomoerysotrine中文名：別名：分子式：C20H273
錨蛋白重復結構域蛋白9抗體Cephalocyclidin A中文名：別名：分子式：C17H195
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
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