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當前位置:首頁  -  產品中心  -  PCR試劑盒  -  熒光-PCR法  -  48T禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書

禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書

產品簡介

酸葡糖酸三鈉鹽MCP-1 Antibody (Carboxy-rminal Antigen)羥甲基哌啶

替卡西林,替卡西林二鈉UTF1 Antibody1,二酸

替卡西林(標準品)Tropomyosin-1 (D12H4) Rabbit mAb6-氮雜脲嘧啶

更新時間:2021-03-13
訪問次數:1125
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書

 規格

 48T

 貨號

 LZP7947

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
2-氟-1,二甲基化咪唑翁六氟酸酯(DFIH) PARN (A42) Antibody嘧啶酮

肥胖抑制素(大鼠) Snail (L70G2) Mouse mAb2-氨基惡唑

芐索銨Human Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF)對甲氧基酸

β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠PARN (P620) Antibody姜黃素

血管緊張素IPTMScan® Lys-C Proase溴-氟甲

血管緊張素IIIRabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control對氟酰

蜂毒明肽; 蜂針液明肽Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody對氟

枸櫞酸米芬,克羅米芬Bcr Antibody5-甲基-1-茚酮

ML-176;SR-3335Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴嘧啶

Semaxanib(SU-5416 )VCAM-1 (D8U5V) Rabbit mAb (Mouse Specific)嘧啶-5-羧酸

米爾貝肟Gα(z) Antibody對氟甲

2-巰基吡啶-N-氧化物 鋅鹽;吡啶硫酮鋅,吡硫鋅GAPDH (14C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)對氟甲

伐地考昔GAPDH (14C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)氨基-2-甲酸甲酯

胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素Bcr-Abl (b2a2 Junction Specific) (L99H4) Mouse mAb氨基-溴甲酸甲酯

UDPGA Na;尿苷-5'-二酸葡糖酸三鈉鹽MCP-1 Antibody (Carboxy-rminal Antigen)羥甲基哌啶

替卡西林,替卡西林二鈉UTF1 Antibody1,二酸

替卡西林(標準品)Tropomyosin-1 (D12H4) Rabbit mAb6-氮雜脲嘧啶

RGD肽Phospho-p56Dok-2 (Tyr351) Antibody5-氟-鄰二甲

白介素1受體樣1(IL1RL1)ELISA試劑盒RT  端粒酶逆轉錄酶100 ul

白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒TRODOTOXIN ( TTX )  素100 ul

白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)ELISA試劑盒TP-1/P1  端粒酶相關蛋白120 ul

白介素1β前體(pro-IL1B)ELISA試劑盒traspan5  四分子交聯體5100 ul

白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒TFF2  三葉肽因子220 ul

白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒TFF3  三葉肽因子3100 ul

白介素18(IL-18)ELISA試劑盒TIF1 Alpha/TRIM24  轉錄中介因子Tif1α100 ul

白介素17(IL-17)ELISA試劑盒TIF1 beta/KAP1  轉錄中介因子Tif1β100 ul

白介素16(IL-16)ELISA試劑盒Phospho-TIF1beta (Ser824)  酸化轉錄中介因子Tif1β100 ul
禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書β鏈接素相互作用蛋白1抗體Xanthyletin中文名:花椒樹皮素甲別名:美洲花椒素分子式:C14H12O3

磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體Diversoside中文名:別名:Marmin 6'-O-glucoside分子式:C25H34O10

磷酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體Chalepensin中文名:別名:Xylotenin分子式:C16H14O3

磷酸化N-鈣粘附分子抗體Hydramicromelin D中文名:別名:分子式:C15H14O7

磷酸化后期促進復合蛋白3抗體7-Prenyloxycoumarin中文名:7-異戊烯氧基別名:7-Isopentenyloxycoumarin分子式:C14H14O3

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