歡迎進入上海聯祖生物科技有限公司網站！
13482402338
歡迎進入上海聯祖生物科技有限公司網站！
13482402338
Product Center
產品簡介
錐蟲通用PCR檢測試劑盒價格上海聯祖生物相關產品:LC1檢測試劑盒 1.*抗體----高效、靈敏、特異2.規范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高
產品分類
相關文章
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 錐蟲通用PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Trypanosoma spp.PCR |
貨號 | LZP7437 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
?
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
BCMFmoc-Asp(OtBu)-Wang resin 100-200 mesh, 1%DVB雙草 分析標準品，99.3%
Thiophanate-methylDL-氨酸甲酯鹽酸鹽 98%多菌靈標準溶液 100μg/ml,u=3%
SimazineH-D-Arg-NH<SUB>2</SUB>·2HCl ≥98.5%多菌靈標準溶液 10μg/ml,u=3%
ToosendaninN5-[[[(2,3-二氫-2,2,4,6,7-五甲基-5-苯并呋喃)磺酰]氨基]亞氨甲 分析標準品，98%
AmylopectinL-天冬氨酸1-芐酯 98%標準溶液 100μg/ml,u=3%,基體:酮
Amylose from potatoL-天門冬氨酸 1-甲酯 98%標準溶液 10μg/ml,u=4%
Starch from potatoL-天冬氨酸-1-叔丁酯 98%毒死蜱 分析標準品，99%
Potato extractL-天冬氨酸-4-環己酯 98%毒死蜱標準溶液 10μg/ml,u=6～3%，酮
Starch solubleL-天門冬氨酸-4-叔丁基酯 98%毒死蜱標準溶液 100μg/ml,u=6～3%，酮
MaltodextrinL-天冬氨酸二叔丁基酯鹽酸鹽 98%高效氯氟菊酯 分析標準品,99%
DextrinD-天冬氨酸 4-叔丁酯 98%高效氯氟菊酯標準溶液 100μg/ml,u=2%，基體:石油
α-cyclodextrinN-乙酰-D-色氨酸 98%高效氯氟菊酯標準溶液 10μg/ml,u=3%，基體:石油
β-CyclodextrinD-3-(1-萘基)-氨酸鹽酸鹽 99%高效氟氯菊酯 分析標準品，96%
HPCD3-(1-萘基)-L-氨酸 98%氟氯菊酯標準溶液 100μg/ml,u=4%，基體：正己烷
Sulfobutylether-β-Cyclodextrin3-氨基-L-酪氨酸 98%氟氯菊酯標準溶液 10μg/ml,u=5%，基體：正己烷
Methyl-β-cyclodextrin D-氨基 98%氯菊酯 分析標準品，97.5%
烯效唑(分析標準品97.5%)PERK (C33E10) Rabbit mAbMX2/MXB 干擾素誘導GTP結合蛋白MX2抗體
β-六六六標準溶液(100μg/ml,u=3%)Phospho-IRS-1 (Ser612) (L7B8) Mouse mAbMVK 甲羥戊酸激酶抗體
β-六六六標準溶液(100μg/ml,溶劑：甲)CD19 (SJ25C1) Mouse mAb (APC Conjugate)MVD 甲羥戊酸脫羧酶抗體
β-六六六標準溶液(10μg/ml,u=6%)IRS-1 (L3D12) Mouse mAbMUSK 肌肉骨骼受體酪氨酸激酶抗體
δ-六六六標準溶液(100μg/ml,溶劑：甲)ABCA7 Antibody (Mouse Specific)Musashi 1/Msi1 神經干細胞RNA結合蛋白Musashi1抗體
δ-六六六標準溶液(100μg/ml,u=3%)E-Cadherin (24E10) Rabbit mAbMURF3 肌肉特異性環指蛋白3抗體
δ-六六六標準溶液(10μg/ml,u=6%)E-Cadherin (24E10) Rabbit mAbMURF3 肌肉特定環指蛋白3抗體
鹽酸標準溶液(0.1017mol/L)Basic FGF (19A9) Rabbit mAbMURF2 肌肉特異性環指蛋白2抗體
2-羥基-5-硝基煙酸(98%)EGF Receptor (L858R Mutant Specific) (43B2) Rabbit mAbMuRF1/Trim63 肌肉細胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體
正己烷(無級, 95%)PKM2 AntibodyMUM1/FLJ14868 突變的黑色素瘤相關抗原1抗體
錐蟲通用PCR檢測試劑盒價格內皮素1抗體Azathioprine中文名：硫唑嘌呤別名：分子式：C9H7N7O2S
蝮蛇蛇毒蛋白抗體2-Benzothiazolol中文名：2-羥基苯并噻唑別名：分子式：C7H5S
表皮生長因子受體底物8抗體1,2-Benzanthraquine中文名：1,2-苯并奎寧酮別名：分子式：C18H10O2
早期生長應答蛋白1抗體9-Anthracenecarboxylic acid中文名：9-蒽甲酸別名：分子式：C15H10O2
表皮膜蛋白1抗體Artemether中文名：蒿甲醚別名：分子式：C16H26O5
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
當前位置：
上一個：
返回列表
